Effects of low intensity laser in in vitro bacterial culture and in vivo infected wounds / Efeitos do laser de baixa intensidade em cultura bacteriana in vitro e ferida infectada in vivo

OBJECTIVE: to compare the effects of low intensity laser therapy on in vitro bacterial growth and in vivo in infected wounds, and to analyze the effectiveness of the AsGa Laser technology in in vivo wound infections. METHODS: in vitro: Staphylococcus aureus were incubated on blood agar plates, half of them being irradiated with 904 nm wavelength laser and dose of 3J/cm2 daily for seven days. In vivo: 32 male Wistar rats were divided into control group (uninfected) and Experimental Group (Infected). Half of the animals had their wounds irradiated. RESULTS: in vitro: there was no statistically significant variation between the experimental groups as for the source plates and the derived ones (p>0.05). In vivo: there was a significant increase in the deposition of type I and III collagen in the wounds of the infected and irradiated animals when assessed on the fourth day of the experiment (p=0.034). CONCLUSION: low-intensity Laser Therapy applied with a wavelength of 904nm and dose 3J/cm2 did not alter the in vitro growth of S. aureus in experimental groups; in vivo, however, it showed significant increase in the deposition of type I and III collagen in the wound of infected and irradiated animals on the fourth day of the experiment. .

OBJETIVO: comparar os efeitos da terapia a laser de baixa intensidade no crescimento bacteriano in vitro e em feridas infectadas in vivo, e analisar a efetividade da tecnologia Laser AsGa, em feridas infectadas in vivo. MÉTODOS: in vitro: cepas de Staphylococcus aureus foram incubadas em placas de agar-sangue e irradiadas com laser de 904nm de comprimento de onda e dose de 3J/cm2, diariamente durante sete dias. In vivo: 32 ratos machos Wistar foram distribuídos em Grupo Controle (Não Infectado) e Grupo Experimental (Infectados). Metade dos ratos tiveram suas feridas irradiadas e a outra metade não irradiada, como realizado no estudo in vitro. RESULTADOS: in vitro: não houve variação estatística significativa entre os grupos experimentais, considerando as placas matrizes e derivadas (p>0,05). In vivo: houve aumento significativo na deposição de colágeno tipo I e III na cicatriz do grupo dos animais infectados e irradiados, quando avaliados no quarto dia de experimento (p=0,034). CONCLUSÃO: a Low-Intensity Laser Therapy aplicada com comprimento de onda de 904nm e dose de 3J/cm2, in vitro: não alterou o crescimento de S. aureus nos grupos experimentais. In vivo: mostrou aumento significativo na deposição de colágeno tipo I e III na cicatriz no grupo dos animais infectados e irradiados no quarto dia de experimento. .

Perfil epidemiológico de casos de surtos de doenças transmitidas poralimentos ocorridos no Paraná, Brasil / Epidemiological profile of foodborne diseases outbreaks occurred in Parana state, Brazil

A investigação dos surtos de Doenças Transmitidas por Alimentos (DTA) é desafiadora. Para a Vigilância em Saúde é fundamental a identificação de grupos e fatores de risco associados às DTA. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o perfil epidemiológico dos surtos de DTA ocorridos nos 29 municípiosque compõe a 2ª Regional de Saúde, da Secretaria Estadual de Saúde do Paraná, Brasil, entre 2005-2008. Tabularam-se 472 laudos de alimentos do Laboratório Central do Estado do Paraná (LACEN-PR) e fichas notificadas no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) de casos suspeitos de DTA. O grupo mais acometido foi de indivíduos do sexo feminino com 50,51% dos casos. Indivíduos entre 20 a 49 anos de idade foram os mais frequentemente envolvidos com 49,50% das ocorrências. Restaurantes (27,65%) e residências dos indivíduos acometidos (36,17%) foram os locais de preparo econsumo mais frequentemente envolvidos. Manipulação/preparo inadequados dos alimentos (36,95%) eforma de consumo inadequada (23,90%) foram os fatores causais mais predominantes. A maior parte dasconfirmações dos surtos fundamentou-se em achados clínico-epidemiológicos (44,68%). Com relaçãoaos micro-organismos identificados nas amostras analisadas, os resultados apontaram predominância Escherichia coli (indicador sanitário), seguido pelo Bacillus cereus e Staphyloccus aureus. Os alimentos mais frequentemente envolvidos foram o leite (29,68%) e as frutas, verduras e legumes (24,21%). Com a pesquisa é possível orientar medidas preventivas e de controle de DTA na população pesquisada.

The investigation of outbreaks of Food Borne Diseases (FBD) is challenging. For the Health Surveillance is essential to identify groups and risk factors associated with the DTA. The aim of this study was to characterize the epidemiology of outbreaks of DTA occurred in 29 counties that comprise the 2nd Regional Health, the Department of Health of Paraná, Brazil, from 2005-2008. Tabulated to 472 reports of food the Central Laboratory of the State of Paraná (LACEN-PR) chips and notified the Information System for Notifiable Diseases (SINAN) of suspected cases of DTA. The group most affected were females with 50.51% of the cases. Individuals between 20 and 49 years of age were most often involved in 49.50% of cases. Restaurants (27.65%) of affected individuals and households (36.17%) were the preparation and consumption sites most frequently involved. Manipulation / inadequate preparation of food (36.95%) and inadequate form of consumption (23.90%) were the most prevalent causative factors.Most confirmations of outbreaks was based on clinical and epidemiological (44.68%). With respect to micro-organisms identified in the samples analyzed, the results showed predominance Escherichia coli(health indicator), followed by Bacillus cereus and Staphylococcus aureus. The foods most frequently involved were milk (29.68%) and fruits and vegetables (24.21%). With this study can guide preventive measures and control of DTA in the population studied.

Validação do teste de inibição pelo ácido aminofenilborônico para triagem de Klebsiella pneumoniae carbapenemases (KPC) / Validation of inhibition test by aminophenyl boronic acid to Klebsiella pneumoniae carbapenemases (KPC) screening

INTRODUÇÃO: A produção de enzimas Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) tem se tornado um importante e preocupante mecanismo de resistência, e ensaios que combinem alta sensibilidade e alta especificidade para a detecção dessas enzimas são escassos. OBJETIVO: Validar o teste de inibição pelo ácido 3-aminofenilborônico como método de triagem fenotípica de cepas produtoras de enzima KPC, comparando os resultados obtidos com os de testes confirmatórios por reação em cadeia da polimerase (PCR). METODOLOGIA: Avaliou-se o uso do ácido 3-aminofenilborônico impregnado em discos de antibióticos de imipenem, meropenem e ertapenem. Foram testadas 36 cepas positivas e 12 negativas, todas confirmadas por PCR. Foram ainda testadas três concentrações diferentes de ácido borônico: 300, 400 e 600 µg. RESULTADOS: Entre as cepas positivas testadas, o resultado mais adequado se deu com a adição do composto em disco contendo ertapenem, com especificidade de 100%, porém com sensibilidade de apenas 50%. CONCLUSÃO: Novos estudos são necessários, sobretudo no que diz respeito à padronização da técnica e aos insumos utilizados, pois o método se revela promissor na triagem de cepas produtoras de KPC.

INTRODUCTION: The production of Klebsiella pneumoniae carbapenemases enzymes (KPC) has become an important and worrisome resistance mechanism. Furthermore, tests that combine high sensitivity and high specificity for the detection of these enzymes are scarce. OBJECTIVE: To validate the inhibition test by 3-aminophenyl boronic acid as a phenotypic screening method for KPC-producing strains by comparing the results with confirmatory polymerase chain reaction testing (PCR). METHODS: We evaluated the use of 3-aminophenyl boronic acid applied on disks with imipenem, meropenem and ertapenem antibiotics. 36 strains were positive and 12 were negative, all confirmed by PCR. Three different concentrations of boronic acid were also tested: 300, 400 and 600 µg. RESULTS: Among the positive strains, the results were more accurate with the addition of the compound to the ertapenem disk, presenting 100 % specificity and 50% sensitivity. CONCLUSION: Further studies are required, mainly regarding the standardization of the technique and materials, since the method seems to be promising as to the screening of KPC strains.

Risk factors for KPC-producing Klebsiella pneumoniae bacteremia

The molecular epidemiology of carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae (KPC) has been largely investigated, but limited clinical information is available. A case-control study was performed to evaluate the risk factors for KPC bacteremia in hospitalized patients. Cases were patients with KPC bacteremia and controls were patients with non-KPC bacteremia. A total of 85 patients were included, 18 (21.2%) were KPC, and 67 (78.8%) were non-KPC (40 [59.7%] of them were extended-spectrum beta-lactamase producers). All KPC isolates were type 2 producers. These isolates belong to five distinct clones. Multivariate analysis showed that age (odds ratio [OR], 1.06; 95% confidence interval [CI], 1.02 - 1.11; p = 0.004), presence of mechanical ventilation (OR, 11.1; 95% CI, 1.92 - 63.3; p = 0.007) and fluoroquinolone exposure during hospitalization (OR, 28.9; 95% CI, 1.85 - 454.6; p = 0.02) were independent risk factors for KPC in patients with K. pneumoniae bacteremia. Factors associated with severity of illness, such as age and mechanical ventilation, seem to be the main risks factors for KPC. Fluoroquinolones use might be a risk factor for KPC bacteremia. Further investigations on risk factors for KPC are warranted.

Rastreabilidade das causas de não conformidades em meios de cultura / Traceability of the causes of non-compliance in culture media

O processo de produção de meios de cultura deve garantir a liberação do produto dentro das especificações requeridas em normas e legislações. Quando o produto apresentar resultado não conforme com as especificações, deve-se buscar a causa raiz do problema e implantar ações corretivas. A rastreabilidade das causas de não conformidades deve ser uma etapa de decisão rápida. Objetivando elaborar ferramentas da qualidade voltadas a esta rastreabilidade e verificar a sua aplicabilidade em estudos de casos,foram analisados manuais e registros de produção e controle dos produtos. Foi aplicada a metodologia de rainstorming, a produção e o controle foram mapeados e com o Diagrama de Causa e Efeito foi possível estabelecer os pontos críticos. As ferramentas da qualidade propostas foram Fluxogramas e Folhas de Verificação de Processos, cuja aplicabilidade foi avaliada em lotes de meios de cultura não conformes. Os resultados mostraram que as ferramentas foram capazes de indicar, localizar e confirmar as nãoconformidades e as suas origens. Porém, para a investigação aprofundada da causa torna-se necessário, além destas ferramentas, o conhecimento técnico em microbiologia, a pesquisa em literaturas e Brainstorming permanente, possibilitando tomada de decisãoconfiável em desvios da qualidade dos meios de cultura.

The process of production of culture media should ensure the release of the product within the specifications required by rules and laws. When the product does not produce results consistent with the specifications, you should seek the root cause of the problem and implement corrective actions. The traceability of the causes of non-conformities should be a stage of rapid decision. Aiming at producing quality tools focussed on traceability and verifying its applicability in case studies, manuals and records were analyzed for the production and control of products. The methodology of Brainstorming was used, the productionand control have been mapped and, with the Diagram of Cause and Effect, it was possible to establish the critical points. The quality tools proposed were flow charts and Verification Process sheets, whose applicability was evaluated in batches of noncompliant culture media. The results showed that the tools were able to indicate, locate and confirm the non-conformities and their origins. However, for a detailed case nvestigation, besides these tools, technical knowledge in microbiology, research in different literature and permanent Brainstorming, are necessary thus enabling reliable decision making related to gaps in the quality of culture media.

Detecção de metalo-beta-lactamases em amostras de pseudomonas aeruginosa isoladas em Porto Alegre, Rio Grande do Sul / Detection of metallo-beta-lactamase producing pseudomonas aeruginosa isolated in Porto Alegre,Rio Grande do Sul, Brazil

As metalo-beta-lactamases (MBLs) pertencem ao grupo 3 de beta-lactamases de espectro estendido, fazendo parte de uma classefuncional de metaloenzimas classificadas com base na sua capacidade de hidrolisar os carbapenemicos como o Imipenem e em suas caracteristicas de serem inibidas por agentes quelantes como o acido etilenodiamino tetra-acetico (EDTA) e acido 2-mercaptopropionico (2-MPA). Este estudo objetivou a deteccao de MBLs em amostras nosocomiais de P. aeruginosa resistentes a Ceftazidima, provenientes de um hospital de medio porte de Porto Alegre-RS. Foram analisados 113 isolados clinicos atraves de testes fenotipicos, sendo: 80 (70,7%) do trato respiratorio inferior, 24 (21,2%) urina, 3 (2,7%) hemocultura, 3 (2,7%) ponta de cateter, 2 (1,8%) colecao de cavidadese 1 (0,9%) liquor. Com relacao a producao de MBLs, detectou-se 35 amostras (31,0%) como sendo produtoras.

Metallo-beta-lactamases belongs to the group 3 of extended spectrum beta-lactamases, making part of a common functional class of metal enzymes classified based in their ability to hydrolyze Imipenem and in your characteristics of been inhibited by ions of chelating metals, like EDTA and 2-MPA. The aim of this study was detect MBLs in samples of P. aeruginosa resistant to ceftazidime in the patients of PortoAlegre- RS Brazil. The samples was provided of different clinical specimens like: 80 (70,7%) respiratory tract, 24 (21,2%) urine, blood 3 (2,7%), catheter 3 (2,7%), 2 (1,8%) corporeal secretions and 1 (0,9%) liquor. With regard to the MBLs production, we detect 35 (31%) as being producing.

An outbreak of Streptococcus dysgalactiae subsp equisimilis in a hospital in the south of Brazil

The beta-hemolytic group C streptococci (Lancefield's group) has been considered an emergent human pathogen, showing an important role as an opportunist agent, being responsible for nosocomial infections and outbreaks. This study is reporting the first outbreak of nosocomial infection caused by Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis in Brazil. From January, 2002, to December, 2004, S. equisimilis was isolated in 67/207 (32.37 percent) samples from secretions of patients' infected wounds, interned at the Hospital of Sanitary Dermatology in the State of Paraná (HDSPR). The prevalence of this microorganism increased from 11/42 (26.19 percent) in 2002, 14/65 (21.54 percent) in 2003 to 42/100 (42.00 percent) in 2004. This increase was statistically significant (p=0.024), and this microorganism became the most frequently isolated in these patients, overtaking the rates of isolation of Pseudomonas aeruginosa. The S. equisimilis grew in pure culture, as a unique microorganism, in six samples (2.9 percent) out of 207. Fresh feces of 15 animals (horses and sheep) living in the proximities of the hospital were also examined and three of them positive for S. equisimilis. The biochemical profile of the strains isolated from the patients and from the animals was the same. These animals might have been the source of the dissemination of the outbreak in the hospital. New studies will be necessary to confirm the genetic relationship between the strains isolated from patients and animals.

O estreptococo beta-hemolítico do grupo C de Lancefield tem sido considerado patógeno humano emergente, mostrando importante papel como agente oportunista, implicado algumas vezes em infecções hospitalares e surtos. Este estudo está relatando o primeiro surto de infecção hospitalar causado pelos Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis no Brasil. De janeiro de 2002 a dezembro de 2004, isolou-se S. equisimilis em 67/207 (32,37 por cento) das amostras de secreções de lesões de feridas coletadas de pacientes internados no Hospital de Dermatologia Sanitária do Paraná (HDSPR). A prevalência deste microrganismo aumentou de 11/42 (26,19 por cento) em 2002, 14/65 (21,54 por cento) em 2003 para 42/100 (42,00 por cento) em 2004. Este aumento foi estatisticamente significante (p=0.024), tornando este microrganismo o mais freqüentemente isolado nos pacientes, ultrapassando as taxas de isolamento de Pseudomonas aeruginosa. Em seis amostras (2,9 por cento) entre as 207 examinadas, S. equisimilis cresceu em cultivo puro, como único microrganismo. Também foram examinadas fezes frescas de 15 animais (cavalos e ovelhas) que vivem nas proximidades do hospital, e três amostras foram positivas para S. equisimilis. O perfil bioquímico encontrado entre os isolados dos pacientes foi o mesmo encontrado entre os isolados das fezes dos animais. Acredita-se que estes animais possam ter sido a fonte de disseminação do surto no hospital. Novos estudos serão necessários para confirmar o relacionamento genético entre os isolados dos pacientes e animais.

Infection on the meshes implantation area in the abdominal wall of rats with induced bacterial peritonitis

OBJETIVO: Avaliar a incidência do crescimento bacteriano em telas de polipropileno implantadas na parede abdominal de ratos, após a indução de peritonite bacteriana.MÉTODOS: Utilizaram-se 36 animais alocados em dois grupos: grupo B, experimento (n=18) e grupo S, controle (n=18). Os ratos foram submetidos ao implante de telas de polipropileno na parede abdominal, no espaço pré-peritoneal. Em seguida, nos animais do grupo experimento, procedeu-se à indução de peritonite pela inoculação na cavidade peritoneal de solução padronizada de Escherichia coli. Nos animais do grupo controle procedeu-se à inoculação de solução fisiológica. Os animais de ambos os grupos foram realocados em três subgrupos de seis animais e acompanhados até as reoperações para avaliação dos sítios de implantação, coleta das telas para culturas, avaliação da cavidade e lavados peritoneais para culturas. As reoperações ocorreram com 24, 48 e 72 horas.RESULTADOS: Todos os animais do grupo experimento apresentaram quadro de peritonite. As culturas das telas retiradas dos sítios de implantação mostraram-se positivas em 83% dos animais quando o momento das avaliações foi de 24 horas, diminuindo para 33% em 48 horas e 17% em 72 horas, globalmente foi de 44%. Nos animais do grupo controle não houve nenhum caso de cultura positiva, tanto nas telas quanto nos lavados peritoneais. CONCLUSÕES: O modelo experimental utilizado foi efetivo produzindo 100% de peritonites. A incidência de crescimento bacteriano nas telas de polipropileno implantadas foi de 83% com 24 horas, decrescendo com o passar do tempo.

Translocação bacteriana após obstrução biliar em ratos / Bacterial translocation after biliary obstruction in rats

A translocação bacteriana pode estar relacionada à sepse em pacientes com doença obstrutiva das vias biliares. O presente estudo procura testar a hipótese de que a obstrução biliar seria um fator predisponente à ocorrência da translocação bacteriana. Através de modelo murino, utilziamos 32 ratos Wistar, machos, que foram alocados em 4 grupos de oito componentes cada. Os grupos de número II, III, e IV foram submetidos ao procedimento de ligadura do ducto biliar comum e após 2, 7 e 21 dias, respectivamente, cultura do linfonodo mesentérico. No grupo I (controle), o linfonodo mesentérico foi enviado ao estudo microbiológico sem a presença de obstrução biliar. Entre os ratos que sofreram o procedimento de obstrução biliar, 56,52 por cento apresentaram translocação bacteriana para o complexo do linfonodo mesentérico. No grupo controle não houve o crescimento de bact´´erias. Os dados deste estudo se correlacionam com os da literatura atual em afirmar que a obstruçaõ biliar é um fator que promove a translocação bacteriana em modelos murinos

Hospital gowns as a vehicle for bacterial dissemination in an intensive care unit

The microbiota from the uniforms of 31 professionals from the general intensive care unit was analyzed. The samples were collected in duplicate at the beginning and at the end of the work period. Total viable counts of microorganisms were determined; there was a significant increase in the counts at the end of the period, when compared with those obtained at the beginning. No significant difference was observed between the first and second counts obtained from the cuffs. However, differences were observed for the samples from the abdominal region. Among the isolated pathogens 11/18 were Staphylococcus aureus, 2/18 were Acinetobacter baumannii, 2/18 were Klebsiela pneumoniae and 1/18 were Serratia rubidae. Some of these isolates were multi-resistant to antibiotics. Emphasis should be placed on reducing the spread of these pathogens in the hospital, making sure that biosafety protocols are followed by the staff.